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    3. 酶標儀的原理及應用

      上傳時間:2021/4/12 0:00:00 來源:易買儀器網 點擊:651

       酶標儀(Microplate Reader)是對酶聯免疫檢測(EIA)實驗結果進行讀取和分析的專業儀器。酶聯免疫反應是通過偶聯在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進行的,反應結果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。酶標儀實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。

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      一、酶標儀的工作原理
          使抗原抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原抗體與某種連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,最后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度
      二、酶標儀的應用
           酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,特別在近幾年中,由于大量的酶聯免疫檢測試劑盒的應 用,使得酶標儀在生殖保健領域中應用越來越廣泛,同時促進了生殖健康技術水平提高。目前在國內血站臨床試驗室中酶標儀成為ELISA測定的重要工具。在農業中利用酶標儀研究酚氧化酶,為開發以該酶為靶標的新型害蟲控制劑提供理論依據。伏馬菌素是最近發現的一族主要由幾種真菌產生的結構相關的毒素代謝產物,該毒素已被世界衛生組織列為近年來首先進行研究的幾種霉菌毒素之一。因此快速、高效的檢測伏馬菌素便顯得尤為重要。在450nm或630nm的濾鏡下使用酶標儀對微孔板進行光學測量,可以檢測伏馬菌素的含量,在食品安全方面有著重要的應用。生長曲線一般指菌落總數CFU/mI。或者菌落總數的對數log CFU/ml。隨時間變化曲線,可用來展示微生物生長情況和新陳代謝規律。目前通過分光光度計測定菌懸液時存在即時性差、操作繁瑣、易污染等缺點,由于酶標儀是一種快速、準確、高通量的儀器,所以我們總會選擇使用酶標儀來進行菌懸液OD值的測定,來提高工作效率,節約時間。

             Thermofisher新推出的全波長讀數儀Multiskan GO支持終點法、動力學和光譜掃描測量,采用氙燈作為光源,通過先進的光柵系統進行波長選擇,波長范圍從200nm到1000nm,可以1nm步進量進行全光譜掃描,包括紫外和近紅外,可以自由選擇任何波長。其具備微孔板和比色杯測量的雙重功能,既可作為全波長酶標儀,也可作為全波長分光光度計使用。


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